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    揭秘中國人群腎癌關鍵致病基因:復旦交大團隊發文《自然·通訊》

    點擊次數:77 發布時間:2022-06-06

    如多數腫瘤一樣,腎癌的分子分型是提高腎癌療效及腎癌精準治療的關鍵。

    美國臨床腫瘤蛋白質組學會(Clinical Proteomic Tumor Analysis Consortium, CPTAC)曾公布了103例透明細胞腎癌患者的蛋白質基因組學特征,為歐美國家的腎癌精準治療提供了依據。但該數據來源于西方腎癌患者,同國內的患者存在差距,該研究并不能滿足國內腎癌臨床和基礎研究中的迫切需求。

    復旦大學丁琛教授團隊、葉定偉教授團隊和上海交通大學趙健元教授團隊聯合對232例本土腎癌患者人群的腎透明細胞癌(Clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)進行了分析 ,綜合蛋白組、基因組并結合患者臨床病理特征和生存數據,描繪了中國透明細胞腎癌的蛋白質基因表達圖譜,揭示了中國人群腎癌關鍵致病基因變異。為更優的診療提供了依據。該工作發表于《自然·通訊》1。

    下圖描述了該研究的整體思路和方法。

    Fig. 1a: Schematic representation of the multiomics analyses of ccRCC, including sample preparation, protein identification, WES, and function verification.

     

    2.1.png

     

    其中WES(全外顯子組測序)是關鍵數據之一。

    作者在文中特別提到,該工作分別使用了IDT埃德特公司的DNA建庫試劑盒(原Swift Biosciences*)、接頭、外顯子WES panel以及定制探針,并使用到了貝克曼庫爾特的SPRIselect (Beckman, B23319)進行了文庫的純化。


    * 2021年3月,IDT埃德特完成對于Swift Biosciences公司的收購。


    IDT埃德特公司的相關產品:


    1. IDT xGen cfDNA & FFPE DNA 建庫試劑盒

    使用該試劑盒可對cfDNA樣本或FFPE組織提取的 DNA 樣本進行靈敏、準確的變異檢測。使用該試劑盒的專用連接法,可使轉化率達到最高并抑制接頭二聚體形成。在單鏈連接期間引入特異性分子標簽 (UMI) 序列,便于采用多種去重和糾錯法。


    2. 原Swift Accel-NGS 2S Hyb DNA 建庫試劑盒(現IDT 2S Hyb DNA 建庫試劑盒)

    利用獨特的技術,保證樣品高效的文庫轉化率,使得降解樣品和低起始量等困難樣品(例如FFPE、cfDNA等樣品)產出高質量的測序數據。只需≥10 ng cfDNA 或≥ 100 ng gDNA即可進行PCR-free建庫流程。獨特的5’ 和3’ 修復步驟,針對損傷樣品(如物理打斷后產生損失)進行修復;對于富含AT/GC的基因組區域覆蓋度均一,適用于多種樣品類型;優異、高效的文庫轉化效率使得更多分子進行轉化,保持更高的文庫復雜度;無需接頭稀釋,不同起始量也可保持穩定的文庫轉化效率。


    3. IDT全外顯子捕獲試劑盒(xGen Exome Research Panel)

    IDT全外顯子捕獲試劑盒(xGen Exome Research Panel)v2由 415,115 條單獨合成且經過質控檢驗的 xGen Lockdown 探針組成。探針組跨越人基因組的 34 Mb 目標區域(19,433 個基因),并且覆蓋 39 Mb 的探針空間(即由探針覆蓋的基因組區域)。探針組中的所有探針均嚴格按照 ISO 13485 標準進行生產。探針使用全新的“捕獲感知”(capture-aware) 算法進行設計,并進行了專有的脫靶分析,確保實現最完整的設計覆蓋度。每條探針均經過質譜法和雙定量測量檢驗,確保探針的質量及在探針庫中具有適當的代表性。通過始終如一的深度覆蓋,致力于推動臨床科學研究。


    關于貝克曼庫爾特的SPRselect:

    SPRI純化技術采用順磁性磁珠、選擇性的結合特定大小的核酸,已廣泛應用于NGS的純化及片段篩選等領域,被超200多主流NGS試劑盒推薦,超15,000篇論文引用。相比于傳統純化磁珠,SPRIselect更具備如下優勢:


    1,室溫儲存。

    即拿即用、省錢省時:節省昂貴的冰箱空間,更省去大量溫度平衡的時間;

     

    2,精準的片段篩選,且保證不同批次間穩定性。

    不論今年或明年,可靠的SPRIselect將始終如一的產出可重復的片篩結果,無需重復測試磁珠比例。如下圖所示,不同批次間片篩均值差異不超過2 bp。提供片段篩選濃度指引。

     

     

    2.2.jpg

     

    3,專家選擇

    已有超40個建庫試劑盒推薦SPRIselect;超1,000篇論文選用SPRIselect。


    訂購信息

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    參考文獻:

    1,Qu, Y., Feng, J., Wu, X, et. al. A proteogenomic analysis of clear cell renal cell carcinoma in a Chinese population. Nature Communications. (2022). DOI: 10.1038/s41467-022-29577-x

     

     

     

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